Analisador de toxinas de mofo ST-2000A Conteúdo de aflatoxina B1 Faixa de comprimento de onda 400-900nm Repetitividade ≤ 0,3%

ST-2000A Teste de micotoxinas

O analisador de micotoxinas ST-2000A é um instrumento analítico necessário para o ensaio de imunossorbentes ligados a aflatoxinas e enzimas.ou seja, ensaio de imunossorbção ligado a enzimas (ELISA), é composto por este instrumento e pelo kit B1,que pode ser utilizado para determinar o teor de aflatoxina B1 e outras micotoxinas em amostras de forma limitada e quantitativa (se estiver equipado com outros kits)É amplamente utilizado na detecção de aflatoxina B1 e outras micotoxinas em alimentos, alimentos para animais, óleo, produtos lácteos, medicamentos, bebidas, vinho e outros produtos.

Características de desempenho:

1- Display operation: color LCD screen, videophone distribution board, display of whole board information, touch screen operation (operação com ecrã LCD a cores, quadro de distribuição por videofone, exibição de toda a informação do quadro, operação com ecrã táctil)

2Função da placa vibratória: velocidade da placa vibratória de nível 3, tempo 0-255 segundos ajustável

3Estação de trabalho: software profissional de marcador de enzimas, que pode armazenar 500 grupos de programas, 100000 resultados de amostras e fornecer modos de cálculo ricos, como absorção, equação linear,equação logarítmica, equação quadrática, equação cúbica, equação logarítmica percentagem de absorção-concentração, função spline, taxa de inibição, etc.

Parâmetros técnicos:

Fonte de luz: lâmpada de halogénio importada DC12V 22W

Faixa de comprimento de onda: 400-900 nm

Filtro: 405, 450, 492, 630nm como padrão, outros comprimentos de onda opcionais

Faixa de leitura: 0-4.000Abs

Resolução: 0.001Abs

Erro de indicação: ≤ ± 0,01Abs

Estabilidade: ≤ ± 0,003Abs

Repetitividade: ≤ 0,3%

Tamanho: 400 mm * 260 mm * 200 mm

1 Princípio e aplicação

Este kit utiliza o método ELISA indireto competitivo para detectar a aflatoxina B1 (AFB1) em grãos, alimentos para animais e outras amostras.marcador da enzima do rabanete, anticorpos, reagentes padrão e outros reagentes correspondentes.A aflatoxina B1 na amostra e a placa enzimática são pré-revestidas com o antígeno conjugado para competir pelo anticorpo anti-aflatoxina B1.Após a adição do marcador enzimático, use o substrato TMB para desenvolver a cor. O valor de absorção da amostra está negativamente correlacionado com o teor de aflatoxina B1 contida na amostra.A quantidade residual de aflatoxina B1 na amostra pode ser obtida por comparação com a curva padrão.

2 Indicadores técnicos

2.1 Sensibilidade do kit: 0,03 ppm (ng/ml)

2.2 Modo de reação: 25 °C, 30min~15min

2.3 Limite inferior de detecção:

Cereais 0,15 ppm

Formulário para alimentação animal 0,3 ppb

Óleo comestível, amendoim 0,6 ppm

Molho de soja, trigo e outros alimentos para animais

Cerveja 0,3 ppb

Vinho, molho de soja, vinagre

2.4 Taxa de reação cruzada:

Aflatoxina B1 100%

2.5 Taxa de recuperação da amostra:

Cereais e alimentos para animais para alimentação animal 85% ± 15%

Farinha de amendoim 82 ± 15%

Óleo comestível 85 ± 15%

Molho de soja, trigo e outros alimentos para animais 83 ± 15%

Cerveja 84 ± 15%

Vinho, molho de soja, vinagre............ 87 ± 15%

3 Composição do kit

Placa de marcação de enzimas 96 furos

Solução padrão (capa preta): 1 ml cada

0ppb,00,03 pppb,00,06 ppm,00,12 ppm,00,24 pppb,0.48 pppb

Solução de alto padrão: 100 ppm 1 ml

Marcador enzimático (capuz vermelho)

Solução ativa de anticorpos (capuz azul)

Solução de substrato A (capuz branco) 6 ml

Substrato líquido B (capa preta) 6 ml

Solução de eliminação (capuz amarelo) 6 ml

20 X solução de lavagem concentrada (capa branca) 40 ml

Manual de instruções 1 cópia

4 Equipamento e reagentes necessários

4.1 Aparelhos: testador de aflatoxinas, impressora, homogeneizador, dispositivo de secagem de azoto, oscilador, centrífuga, pipeta graduada, balança (sensibilidade 0,01 g)

4.2 Micro-pipetes: de um único canal 20 μl-200 μl, 100 μl-1000 μl, multicanal 300 μl

4.3 Reagente: metanol, n-hexano, triclorometano ou diclorometano

5 Pré-tratamento da amostra

5.1 Instruções antes do tratamento das amostras:

O aparelho experimental deve estar limpo e utilizar uma cabeça de sucção descartável para evitar contaminação e interferência com os resultados dos experimentos.

5.2 Preparação da solução:

Solução 1: extracto da amostra

70% de metanol, ou seja, V metanol: V água deionizada=7:3.

5.3 Etapas de pré-tratamento da amostra:

5.3.1 Método de transformação dos cereais

1) Pesar 2 g de amostra triturada num tubo centrífugo de 50 ml, adicionar 5 ml de solução de extracção da amostra, agitar durante 5 minutos, 4000 rpm à temperatura ambiente/10 minutos no centro de separação;

2) Pegue 0,5 ml de supernatante, adicione 0,5 ml de água desionizada e misture bem;

3) Tomar 50 μl de análise.

Relação de diluição da amostra: 5 Limite inferior de detecção: 0,15 ppm

5.3.2 Métodos de processamento de amostras com elevada absorção de água, tais como casca de milho e farelo de trigo

1) Pesar 2 g de amostra triturada num tubo centrífugo de 50 ml, adicionar 20 ml de solução de extracção da amostra, agitar durante 5 minutos, 4000 rpm à temperatura ambiente/10 minutos no centro de separação;

2) Pegue 0,5 ml de supernatante, adicione 0,5 ml de água deionizada e misture bem; (Para a amostra com conteúdo de toxina extremamente alto, pode ser diluída com 35% de metanol e depois testada.1 ml da solução misturada em 2) e 0.9 ml de metanol de 35% para misturar. A relação de diluição da amostra final é de 200 e o limite de detecção é de 6 ppm.)

3) Tomar 50 μl de análise.

Relação de diluição da amostra: 20 Limite inferior de detecção: 0,6 ppm

Nota: Dado que a distribuição da toxina na amostra é desigual, é necessário colher amostras de vários pontos e misturá-las completamente antes de colher 2 g para ensaio.

5.3.3 Método de transformação dos alimentos para animais para alimentação animal

1) Pesar 2 g de amostra triturada num tubo centrífugo de 50 ml, adicionar 10 ml de solução de extracção da amostra, agitar durante 5 minutos, 4000 rpm à temperatura ambiente/10 minutos no centro de separação;

2) Pegue 0,5 ml de supernatante, adicione 0,5 ml de água desionizada e misture bem;

3) Tomar 50 μl de análise.

Relação de diluição da amostra: 10 Limite inferior de detecção: 0,3 ppm

5.3.4 Métodos de tratamento dos alimentos para animais de óleo comestível, amendoim e gordura elevada

1) pesar 2 g de amostra triturada num tubo centrífugo de 50 ml, adicionar 8 ml de n-hexano e 10 ml de solução de extracção da amostra, agitar durante 5 min, 4000 rpm à temperatura ambiente/10 min do centro de separação;

2) Retirar o líquido superior, tomar 0,5 ml do líquido inferior e adicionar 0,5 ml de água desionizada, misturar bem, em seguida, tomar 0,5 ml do líquido misturado e adicionar 0,5 ml de metanol de 35%, agitar por 30 segundos;

3) Tomar 50 μl de análise.

Relação de diluição da amostra: 20 Limite inferior de detecção: 0,6 ppm

5.3.5 Alimentos ou condimentos, tais como molhos, trigo, biscoitos, bolos e métodos de transformação de alimentos para animais, tais como concentrado de alimentos para animais.

1) Pesar 2 g de amostra triturada num tubo centrífugo de 50 ml, adicionar 10 ml de solução de extracção da amostra, agitar durante 5 minutos, 4000 rpm à temperatura ambiente/10 minutos no centro de separação;

2) Tomar 2 ml de supernatante, adicionar 4 ml de triclorometanos (ou diclorometanos), agitar durante 5 minutos, 4000 rpm à temperatura ambiente/10 minutos do centro de separação;

3) Transferir o líquido superior para outro recipiente, deixar o líquido inferior em espera, adicionar mais 4 ml de cloroformo (ou diclorometano) ao líquido superior, agitar completamente e misturar durante 5 minutos,e a temperatura ambiente é de 4000 rpm/centro de separação durante 10 minutos;

4) Remover o líquido superior, misturar o líquido inferior duas vezes e misturar completamente;

5) Tomar 2 ml do líquido inferior combinado e secá-lo sob 50-60 °C de nitrogénio;

6) Adicionar 0,5 ml de extracto da amostra para dissolver completamente a substância seca e, em seguida, adicionar 0,5 ml de água desionizada para misturar;

7) Tomar 50 μl de análise.

Relação de diluição da amostra: 10 Limite inferior de detecção: 0,3 ppm

5.3.6 Método de transformação da cerveja

1) Mexer completamente a cerveja (remover o CO2), retirar 2 ml de amostra de cerveja, adicionar 1 ml de água destilada, adicionar 7 ml de metanol e agitar durante 5 minutos;

2) Tomar 0,5 ml de solução de amostra misturada e adicionar 0,5 ml de água desionizada para misturar bem;

3) Tomar 50 μl de análise.

Relação de diluição da amostra: 10 Limite inferior de detecção: 0,3 ppm

5.3.7 Método de tratamento do vinho, molho de soja e vinagre

1) Tomar 2 ml de amostra, adicionar 2 ml de água destilada, adicionar 10 ml de triclorometanos (ou diclorometanos), agitar durante 5 minutos, 4000 rpm à temperatura ambiente/10 minutos do centro de separação;

2) Tomar 1 ml do líquido inferior e secá-lo sob 50-60 °C de nitrogénio;

3) Adicionar 0,5 ml de extracto de amostra para dissolver completamente a substância seca, adicionar 0,5 ml de água desionizada e misturar bem;

5) Tomar 50 μl de análise.

Relação de diluição da amostra: 5 Limite inferior de detecção: 0,15 ppm

6 Etapas do ELISA

Retirar o reagente necessário do ambiente de armazenagem a 4 °C e colocá-lo à temperatura ambiente durante mais de 30 minutos.Pode haver cristais que precisam ser restaurados à temperatura ambiente para se dissolver completamente quando a solução de lavagem é armazenada a frio. Cada reagente líquido deve ser agitado antes da utilização. Retirar o número necessário de placas e quadros microporosos, colocar as placas microporosas não utilizadas em sacos auto-selados e armazená-las a 2-8 °C.

Antes da experiência, 20 × A solução de lavagem concentrada é diluída em solução de lavagem funcional 20 vezes.

6.1 Numeração: numerar os poços correspondentes da amostra e do padrão em sequência, fazer dois buracos paralelos para cada amostra e padrão e registar a posição do buraco padrão e do buraco da amostra..

6.2 Reacção de adição de amostra: adicionar 50 μl/poço de amostra padrão ou de amostra aos respectivos poços, adicionar 50 μl/poço de marcador enzimático, adicionar 50 μl/poço de solução de trabalho de anticorpos,fechar a placa com uma membrana da placa de cobertura, agitar suavemente durante 5 segundos, misturar e reagir a 25 °C durante 30 minutos.

6.3 Lavagem: retirar cuidadosamente a membrana da placa de cobertura, secar o líquido no buraco, lavar completamente o buraco com solução de lavagem de 250 μl/buraco durante 5 vezes, com um intervalo de 30 segundos,e batê-lo seco com papel absorvente (as bolhas que não são removidas após a batida podem ser perfuradas com uma cabeça de arma limpa).

6.4 Desenvolvimento da cor: adicionar 50 μl de solução de substrato A e 50 μl de solução de substrato B a cada buraco, agitar suavemente durante 5 segundos e misturar bem, e desenvolver a cor no escuro a 25 °C durante 15 minutos.

6.5 Terminação: adicionar 50 μl de solução de terminação a cada buraco, agitar suavemente e misturar bem para terminar a reacção.

6.6 Medição do valor de absorção: utilizar o testador de aflatoxinas para medir o valor de absorção de cada buraco a 450 nm (recomenda-se um comprimento de onda duplo de 450/630 nm).A determinação deve ser concluída no prazo de 10 minutos após o término da reação.

6.7 O testador automático de aflatoxinas ST-2000A completa automaticamente a determinação e produz automaticamente os resultados.